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820 人阅读发布时间:2018-10-09 15:11
自从Engvall和Perlman(1971)首次报道建立酶联免疫吸附试验以来,酶联免疫吸附试验专用仪器随着方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程方法制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断ELISA试验,都大大提高了ELISA的特异性,加之电脑化程度极高的ELISA检测仪的使用,使ELISA更为简便实用和标准化,从而使其成为广泛应用的检测方法。
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) 是酶免疫测定技术中应用广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
elisa方法相较其他方法而言,有几大特点
一 灵敏性高
众所周知, 酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应 ,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平 上对其进行定量。
二 特异性强
其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。
由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得到迅速的发展和广泛应用 。目前ELISA方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。