原代细胞牛逼来了

                                                   原代细胞牛逼来了


最近看一部小说，背景交待完毕。。。有一个军火商和女部下说话，军火商说:你30多岁了，还找个男人了，女说:我才不找呢。军火商说:那不行，你卖一辈子抢别到最后不知道原代细胞的好处。秒懂得和看过的举个爪～篇所以说牛逼就是在本公司原代细胞你们快来吧。原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。

操作步骤

(一)胰酶消化法

1.器材:将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2-3秒钟(时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内)再用碘酒消毒腹部，取胎鼠带入超净台内(或将新生小鼠在超净台内)解剖取组织，置平皿中。

2.用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。

3.用手术剪将组织剪成小块(1mm)，再用Hank's液洗三次，转移至小青霉素瓶中。

4.视组织块量加入5-6倍体积的0.25%胰酶液，37℃中消化20-40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。

5.加入3-5ml培养液以终止胰酶消化作用(或加入胰酶抑制剂)。

6.静置5-10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。

7.1000rpm，离心10分钟，弃上清液。

8.加入Hank's液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。

9.加入培养液1-2ml(视细胞量)，血球计数板计数。

10.将细胞调整到5×10/ml左右，转移至25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。

细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同(如胶原酶，透明质酶等)。