如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP,我们建议您使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液,该裂解液在裂解细胞或组织后一般不会形成粘滞的透明状DNA团块,不必采用超声处理就可进行下一步操作。同时,该裂解液还适用于磷酸化蛋白的WB检测。
如果使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液(20118)的效果不是很好,那您的蛋白可能比较特殊,我们建议您可以尝试另外几种裂解液。如果您的蛋白是难溶性的蛋白,建议您可以尝试使用裂解强度更高的裂解液,如RIPA裂解液(强/中);如果您在做IP实验的时候发现背景很高,即有很多非特异性蛋白被IP下来,这时候您需使用裂解强度较强的裂解液,比如RIPA裂解液(强/中)。反之,如果您发现目的蛋白无法IP下来,则说明您使用的裂解液强度过强,此时需使用裂解强度较弱的裂解液,比如RIPA裂解液(弱)。
RIPA裂解液提取的是全蛋白,包括核蛋白、浆蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白(如:核蛋白、膜蛋白)则可利用专门提这类蛋白的试剂盒进行提取。