如何正确分离血清以避免溶血
104 人阅读发布时间:2025-12-10 09:22
在临床检验或科研实验中,获取高质量的血清样本至关重要。溶血是指红细胞破裂,导致血红蛋白释放到血清中,这不仅会影响检测结果(如酶活性、电解质等指标),还可能导致样本报废。因此,在血清分离过程中必须采取有效措施防止溶血发生。
分离方法与防溶血要点
目前常用的血清分离方法主要有自然凝固法和离心法。为避免溶血,应优先采用标准化流程,并注意以下关键点:
1、采血管选择:使用不含肝素的采血管,因肝素可能抑制血小板功能,增加出血风险。
2、促凝处理:若使用促凝剂或分离胶采血管,可加速血液凝固,缩短等待时间,提高血清质量。
3、混匀方式:采血后立即轻轻倒转试管4–5次,使促凝剂均匀分布,切勿剧烈摇晃。
4、凝固条件:将采血管置于室温(20–30°C)下静置30分钟至2小时,待血液完全凝固。避免4°C过夜冷藏,否则易引发溶血。
5、离心参数:
一般样本:3000–4000 rpm(约1000–2000 ×g),离心5–10分钟。
小鼠等动物样本:因其红细胞更脆弱,建议降低转速至1000–1500 rpm,离心10–15分钟。
| 操作环节 |
✅ 正确做法 |
❌ 错误做法 |
风险说明 |
| 采血部位消毒 |
酒精消毒后彻底擦干再穿刺 |
未干即采血 |
酒精残留破坏红细胞膜导致溶血 |
| 抽血速度 |
缓慢、平稳抽取 |
快速用力抽拉针筒 |
负压过大造成机械性溶血 |
| 血液放置 |
室温静置30–60分钟 |
放入4°C冰箱过夜 |
低温诱导溶血 |
| 离心处理 |
3000–4000 rpm,5–10 min |
4000 rpm持续30 min以上 |
产热过多损伤细胞 |
| 动物采血(如小鼠) |
让血液自由滴落,不蹭管壁 |
贴着管口摩擦或挤压 |
物理损伤致溶血 |
避免溶血的核心是“轻柔操作 + 正确设备 + 合理参数”。
优先选用促凝管或分离胶管,采血后室温静置、及时离心,严禁低温过夜或暴力操作。对于动物实验,尤其要注意红细胞脆性差异,调整离心条件。只要严格执行标准化流程,即可获得高质量无溶血的血清样本。