分泌三氯杀螨醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株cbc的制备方法,包含如下步骤:
(1)制备三氯杀螨醇半抗原及三氯杀螨醇完全抗原,将获得的三氯杀螨醇完全抗原制备成完全弗氏佐剂与不完全弗氏佐剂;
(2)将得到的弗氏佐剂通过背部皮下注射,注射进入balb/c小鼠体内进行多次免疫,首次免疫采用完全弗氏佐剂,加强免疫采用不完全弗氏佐剂;
(3)将经过上述免疫过程的小鼠进行采血,通过间接elisa检测小鼠血清免疫效价和免疫抑制能力,筛选出血清中三氯杀螨醇抗体含量高的获得免疫的小鼠;
(4)将筛选出的小鼠用不完全弗氏佐剂再进行最后一次加强免疫,然后通过腹腔注射进行冲刺免疫,冲刺免疫采用不含弗氏佐剂的三氯杀螨醇完全抗原进行;
(5)将进行冲刺免疫后的balb/c小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞融合,将融合的细胞通过培养基培养,利用间接elisa检测阳性细胞孔,并进一步利用间接竞争elisa法测定阳性细胞孔的抑制效果,通过有限稀释法对有最好抑制的阳性细胞孔进行亚克隆,最终筛选出获得能分泌三氯杀螨醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株;

三氯杀螨醇是农牧业生产中常用的一种广谱、低毒有机氯杀螨剂,对螨类有触杀和胃毒作用,对成螨、幼螨及卵均有效。