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公司新闻/正文
如何验证猪ELISA试剂盒的加标回收率？
64 人阅读发布时间：2025-11-06 09:04
猪ELISA试剂盒加标回收率验证需通过加标实验测定，公式为回收率=（加标试样测定值-试样测定值）÷加标量×100%，合格范围通常为70%-120%。
一、验证核心步骤
1、加标设计
选择2个浓度水平（标准曲线线性范围内，如0.5ng/mL、5.0ng/mL），每个浓度做5次平行检测。
加标量原则：与样品本底值相近，不超过待测物含量3倍。
2、实验操作
按试剂盒说明书处理样品，加入已知浓度标准品后测定。
计算回收率：回收率=(加标试样测定值-试样测定值)/加标量×100%。
二、关键判定标准
三、注意事项
基质效应：加标物形态需与样品中待测物一致，避免干扰。
数据有效性：需扣除样品本底值，同时做空白对照。
异常处理：回收率超出范围时，需排查操作误差或试剂盒质量问题。
一、验证核心步骤
1、加标设计
选择2个浓度水平（标准曲线线性范围内，如0.5ng/mL、5.0ng/mL），每个浓度做5次平行检测。
加标量原则：与样品本底值相近，不超过待测物含量3倍。
2、实验操作
按试剂盒说明书处理样品，加入已知浓度标准品后测定。
计算回收率：回收率=(加标试样测定值-试样测定值)/加标量×100%。
二、关键判定标准
| 指标 | 要求范围 | 依据 |
| 回收率 | 70%-120% | 试剂盒验证通用标准 |
| 变异系数（CV） | ≤15% | 批内重复性要求 |
| 平行实验次数 | 每个浓度≥3次 | 减少随机误差 |
基质效应：加标物形态需与样品中待测物一致，避免干扰。
数据有效性：需扣除样品本底值，同时做空白对照。
异常处理：回收率超出范围时，需排查操作误差或试剂盒质量问题。