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55 人阅读发布时间:2025-12-25 09:19
PCR实验中使用的试剂虽本身毒性较低,但常伴随潜在生物样本(如病毒、细菌核酸)及化学助剂(如有机溶剂、强酸碱),存在气溶胶污染、皮肤接触刺激或吸入风险。此外,扩增产物极易造成假阳性,也对操作安全提出更高要求。因此,防护不仅针对试剂本身,更涵盖整个实验链中的交叉污染与生物暴露风险。
防护核心措施
1.个人防护装备(PPE)全面覆盖
实验人员必须穿戴全套防护用品,防止试剂或污染物接触身体:
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防护部位 |
推荐装备 |
功能说明 |
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手部 |
耐化学手套(如乳胶、丁腈)、带滤芯吸头操作时更换频繁 |
防止试剂腐蚀、核酸污染;操作前后及时更换避免交叉 |
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眼/面部 |
防护眼镜 + 面屏 |
防止移液、开盖时液体飞溅入眼 |
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呼吸道 |
N95口罩或防毒面具 |
在处理高风险样本或挥发性试剂时使用,减少吸入气溶胶风险 |
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身体 |
一次性实验服 + 鞋套 |
防止衣物被污染,离室后按医疗废弃物处理 |
补充说明:即使PCR试剂本身低毒,但因常用于病原体检测(如新冠病毒),实际操作中应按二级以上生物安全标准进行防护。
2.实验室分区与单向流程
为避免试剂间交叉污染,尤其是扩增产物反向污染原始试剂,必须实行物理隔离:
实验室应划分为四个独立区域:
试剂准备区 → 样本制备区 → 扩增区 → 产物分析区
各区物品专用,移液器、耗材不得跨区使用;
人员与物品流动须遵循单一方向,不可逆向返回。
这样可确保清洁的PCR试剂不在后续高污染区域暴露。

3.规范操作降低暴露风险
使用带滤芯的吸头防止气溶胶进入移液器内部污染试剂;
移液动作“慢吸慢放”,避免剧烈操作产生气溶胶;
所有试剂小量分装,减少反复冻融和取样带来的污染机会;
开盖前静置片刻,涡旋后等待气溶胶沉降再打开管盖。
4.环境与消毒管理
每日用75%乙醇或含氯消毒剂擦拭台面、仪器表面;
定期使用紫外线照射工作区(尤其是生物安全柜内);
可选用商品化DNA去除剂对顽固核酸污染进行清除。
✅ 建议
建立常态化防护机制:
新员工必须接受生物安全培训并考核合格后上岗;
每次实验设置阴性对照,实时监控是否存在试剂污染;
推荐使用封闭式自动化系统(如芯片式PCR仪),从根本上杜绝开盖导致的气溶胶泄漏。